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淺淡檢查儀器及應用
作者:江蘇消防檢測設備 來源:http://www.shifengquan.cn/發(fā)布時間:2020-08-20 16:03:34
一個實驗室測定結果的可靠性是由其精密度、準確性及可比性所決定的,一般必需從下面幾方面著手。 
一. 選好測定方法; 
二. 購買質量過硬的試劑盒; 
三. 要有質優(yōu)的測試儀器; 
四. 必需進行正確的校準; 
五. 還要規(guī)范化操作; 
六. 搞好過硬的室內質量控制; 
七. 積極參加室間質評活動; 
八. 還要有一支素質高的隊伍。
現(xiàn)就生化分析儀檢查儀器的校準問題提出個人看法。 
 
一、 校準的重要性和必要性 
    首先必須明確生化分析儀不論如何先進,它還是一個比較器,它測試出來的標本結果是隨著標準限的設置不同而變化的。所以,在衛(wèi)生部臨床檢驗中心擬定的“臨床實驗室(定量測定)室內質控工作指南”中明確指出“對測定標本的儀器一定要求進行校準,校準時要選擇合適的(配套的)標準品/校準品;如有可能,校準品應能溯源到參考方法或/和參考物質;對不同的分析項目要根據其特性確立各自的校準頻率。”這說明校準儀器是室內質控的重要部分,強調了校準工作的必要性和重要性,同時指出了校準的方法和要求。 
 
二、 確立測定系統(tǒng)的概念 
    對于一個臨床檢測項目,如果所用方法的測定原理、試劑、儀器、校準品中任何一個不同,都可能得到不同的測定結果。因此,測定系統(tǒng)包括測定原理、試劑、儀器、校準品四要素。如果我們想要得到準確可靠的測定結果,而該結果又具有與國際、國內其他實驗室的可比性,應該自己建立一個標準測定系統(tǒng)。在全自動生化分析儀上使用配套的試劑和標準品,即日立7170使用寶靈曼的試劑和校準品(c.f.a.s),在貝克曼CX-7生化分析儀上使用貝克曼的試劑和校準品等。各儀器廠家均有自己的標準測定系統(tǒng)。對于校準品不能亂用,如絕對不能用貝克曼的校準品校準日立生化儀,同樣也不能用寶靈曼的校準品去校準貝克曼生化儀。 
 
三、 校準品和質控品 
    校準品(Calibration materials)含有已知量的欲測物,用以校準該測定方法的數值,它與該方法及試劑、儀器是相關聯(lián)的。校準品的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)誤差。因此最好為人血清基質,以減少基質效應造成的誤差。 
    質控品(Control materials)只用于和待測標本同時測定的,為了控制標本的測定誤差,因此要求保存時間十分穩(wěn)定。前者是校準其值而后者是控制誤差用的。 
四、 校準前準備 
    1 .了解燈泡已使用多久?檢查飄移是否合乎要求; 
    2. 檢查比色杯的清潔及磨損情況?必要時進行更換; 
    3. 用清潔劑泡洗管道 
    4. 測定儀器的精密度及線性是否達到儀器性能要求? 
 
五、 定值質控血清是否可以校準檢查儀器? 
    我們在相同條件下,同時用五個進口產品,每家兩種不同濃度的定值如TP、ALB、UREA、UA、ALP、GGT、CK、HBDH、LD、AMY等,在日立7170A上進行測定(用常規(guī)試劑),詳見質控血清對部份常規(guī)測定項目(如T、ALB、UREA、Cr、UA、K、Na、Cl、AST、ALT)結果與靶值比較: 
表  不同廠家定值質控對TP、ALB、、AST、ALP結果與靶值 
* 從總蛋白結果來看RANBOX與Bio-Red 相差為6.45%,而寶靈曼與Bio-Red 較為接近; 
* 從白蛋白結果分析,寶靈曼與Bio-Red相對相差5.75%,與總蛋白結果明顯不同。Bio-Red則與汽巴康寧比較接近。 
* UREA結果中凡是高值均上不去,分析其原因很可能與我們采用試劑盒的質量有關,所以試劑盒的線性范圍理應成為選擇試劑盒的重要依據之一。但從低值結果分析,也有5%的偏差(Bio-Red與Human) 
* AST與ALT測定值均低于靶值,這就涉及我們選用什么K值問題。 
* ALP測定中RANDOX(-16.6%)與寶靈曼(2.7%)靶值之間竟相差19.3%,這可能涉及試劑盒選用緩沖液種類,PH值以及所用ε值等有關。 
 
    通過上述結果比較,說明不同廠家生產的定值質控血清靶值之間有的相差較大,提示我們決不能用定值質控血清代替校準品作校準用。
 
六、 校準方法 
    例如日立(Hitachi)系列您必須購買寶靈曼(Boehringer)的試劑及其校準的說明書設置參數,用c.f.a.s.校準血清進行校準,即可獲得各項目的校準K值,同時觀察一下各項目測定時反應進程圖,檢查各項目參數設置是否在最佳位置,如不在最佳位置應予以重新設置并測定。此時得到的K值即為準確的校準K值,然后測定待測的10至20份新鮮血清三次取其平均值,應該說此結果是用Hitachi-Boehringer檢測系統(tǒng)所獲的測定值。然后用此血清值校準其它測定系統(tǒng)。 
表  日立7170、BM試劑連續(xù)四個月每天進行校正(n=81)K值的變化 
 
七、 關于酶活性測定校準問題 
    有的主張不進行校準而采用固定K值,有的作者以為應該進行校準。酶活力計算公式如下: 
      酶活力(u/l)=△A/min×V×106/(ε×v×1) 
      令k=V×106/(ε×v) 
      則酶活力(u/l)=△A/min×k 
    常用K值有以下幾種: 
      a) 理論K值:根據理論摩爾消光系數(ε)來計算,如NADH為6.22×103 
      b) 實測K值:由于儀器波長的精密及半寬度不同,而應根據實測ε值來設定K值 
      c) 廠家給的K值:廠家生產試劑盒說明書上提供的K值(有的廠家提供6.3×103) 
      d) 校準K值:通過校準物直接校準得到的K值 
    在日立7170A全自動生化分析儀上,可以得到幾種不同的酶K值,見下表 
表 日立7170A全自動生化分析儀上用不同方法得到幾種酶的K值 
注:1校準物為寶靈曼c.f.a.s,試劑也用寶靈曼的配套試劑。 
    2括號內數字是該K值與理論K值相比的變化率 
    以上摘自張克堅文章中 
 
* 從上述K值中不難發(fā)現(xiàn)實測K值大于理論K值,這說明生化分析儀的測光系統(tǒng)還存在著一定誤差,如波長、半寬度及光徑等偏差,使儀器達不到理論上的最佳狀態(tài); 
 
* 校準K值與實測K值之間也存在一定的差距,即使指示物和儀器相同,其差異可能由試劑及校準品造成的; 
* 作者認為最好使用校準K值,但必須由兩個先決條件:1必須使用配套的試劑;2必須使用配套的高質量的校準品,但校準K值應有其溯源性。 
 
    關于酶活標準品,歐洲標準局(BCR)和美國國家標準技術研究院(NIST)均發(fā)表了人血清基質的酶活性標準物,相信不久將會有公認的標準(校準)品問世。 
 
八、 必須擬訂校準計劃(文件) 
    校準工作不是僅進行一次就可萬事無憂一勞永逸,而必須經?;0凑?ldquo;臨床實驗室質量控制(QC)的要求(草案)”必須要求擬定校準計劃,其內容包括: 
    1.建立校準方法 
      ⑴選擇合適(配套)的校準品,包括校準品數目、類型和濃度; 
      ⑵如有可能校準品應溯源到參考方法或參考物質; 
      ⑶確定校準的頻度。至少每六個月進行一次校準; 
      ⑷如有下列情況發(fā)生時,必須進行校準 
* 改變試劑的種類,或者批號更換了。如果實驗室能說明改變試劑批號并不影響結果的范圍,則可以不進行校準; 
* 儀器或者檢驗系統(tǒng)進行一次大的預防性維護或者更換了重要部件,這些都有可能影響檢驗性能; 
* 質控反映出異常的趨勢或偏移,或者超出了實驗室規(guī)定的接受限,采取一般性糾正措施后,不能識別和糾正問題時; 
 
2.每個實驗室檢驗儀器必需要有校準計劃。每次校準必須有詳情的記錄和分析。每次校準記錄必須保存?zhèn)洳椤?/span>

      江蘇智淼消防主營:全套消防檢測設備消防安全評估設備軟件、甲乙級防雷檢測裝置、電氣檢測設備、火災現(xiàn)場勘查/消防監(jiān)督檢查箱、二合一消防煙槍、試水/細水霧裝置,產品提供帶送檢服務;江蘇消防檢測設備官網:http://www.shifengquan.cn/;服務熱線:4006-598-119。
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